PROGRAMA DE VIGILANCIA MICROBIOLÓGICA DE ENFERMEDAD MENINGOCÓCICA INVASIVA
DEFINICIÓN Y OBJETIVOS: Caracterización microbiológica y análisis de la evolución de las infecciones por Neisseria meningitidis en España en un contexto Europeo. La información generada a través de este programa permite llevar a cabo medidas de control y prevención basadas en la evidencia, resultando clave a la hora de enfocar estrategias en el desarrollo y la aplicación de vacunas. Patógenos involucrados: Neisseria meningitidis Objetivos: · Proporcionar información microbiológica al Sistema Nacional de Vigilancia y al European Center for Diseases Control (ECDC). · Diagnóstico y caracterización molecular en ausencia de cultivo. · Caracterización de cepas circulantes asociadas a casos clínicos a nivel de serogrupo, genosubtipo, complejo clonal y antígenos vacunales. · Detección y estudio molecular de resistencia a antibióticos.
CRITERIOS DE INCLUSIÓN: Sujetos del estudio: · Casos humanos de enfermedad meningocócica. · Casos humanos sospechosos de ser portadores de Neisseria meningitidis. Participantes: · Cualquier laboratorio de microbiología hospitalaria de la red pública y los laboratorios de salud pública de las CCAA. · Los laboratorios privados realizarán los estudios de referencia a través de la cartera de servicios (precio público) del CNM. Formulario específico: · Se deberá cumplimentar en su totalidad y sin imprecisiones. · La falta de datos veraces implicará que el estudio se tramite por la cartera de servicios (precio público) del CNM.
TIPO DE MUESTRA Y CONDICIONES DE ENVIO: · Muestras clínicas: LCR Sangre con EDTA Suero Líquido petequial En su defecto cualquier otra muestra (incluidas necropsias post-morten) · Aislamientos de Neisseria meningitidis. · Las condiciones de envío deben cumplir las normas de bioseguridad y cada placa/tubo debe estar correctamente sellada. · Envío por sistema de mensajería urgente. · Las muestras deben ser enviadas a temperatura ambiente.
METODOLOGÍA: · Diagnóstico y caracterización molecular en muestras clínicas: Diagnóstico: PCR tiempo real basada en la utilización de sondas (diana: ctrA). Determinación del serogrupo: PCR tiempo real basada en la utilización de sondas (dianas: siaD, synG, synF, sacB). Genosubtipado: Amplificación mediante nested PCR y secuenciación de regiones variables del gen de la proteína de Clase 1 o PorA (VR1 Y VR2). MLST (Multilocus Sequence Typing): Amplificación mediante nested PCR y secuenciación de fragmentos de 7 genes housekeeping.
· Caracterización de aislamientos clínicos: Determinación del serogrupo: Mediante aglutinación con sueros específicos y/o mediante PCR tiempo real. Genosubtipado: Amplificación y secuenciación de regiones variables del gen de la proteína de Clase 1 o PorA (VR1 Y VR2). MLST (7 genes), eMLST (20 genes) y cgMLST (1605 genes): a partir de la secuenciación del genoma completo. Caracterización molecular de los antígenos vacunales fHbp, NHBA y NadA: a partir de la secuenciación del genoma completo. BAST (Bexsero Antigen Sequence Typing). gMATS (genetic Meningococcal Antigen Typing System). Determinación de la concentracción minima inhibitoria (CMI) mediante Etest frente a 6 antimicrobianos (Rifampicina, Ciprofloxacino, Penicilina, Ampicilina, Cefotaxima, Ceftriaxona).
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